应用	建议稀释比
流式细胞分析 (Flow)	1 µg/test

 

产品详细信息

 

FJK-16s抗体可与小鼠、大鼠、犬、猪、牛及猫的Foxp3蛋白（又称FORKHEAD BOX P3、SCURFIN或JM2）发生特异性反应，其与其他蛋白的交叉反应性尚未明确。Foxp3是一种49-55 kDa的蛋白质，属于叉头/翼状螺旋转录调节因子家族，被鉴定为"scurfy"(sf)突变小鼠的缺陷基因。研究表明，CD4+CD25+调节性T细胞（Treg细胞）中foxP3 mRNA组成性高表达，而在CD4+CD25-细胞中异位表达foxp3可赋予这些细胞Treg表型。

 

通过免疫印迹实验确定FJK-16s抗体的表位位于小鼠Foxp3蛋白第75-125氨基酸区间。在人类中，该区域被发现存在mRNA水平的可变剪接现象。可变剪接与非剪接异构体均存在于淋巴细胞CD4+CD25+亚群中。初步RT-PCR实验未在小鼠脾细胞中检测到该可变剪接异构体，提示该基因在小鼠与人类中存在不同的调控机制。

 

应用报告：该FJK-16s抗体已报道可用于细胞内流式细胞分析。

 

验证应用：采用Foxp3/转录因子缓冲试剂盒及相应方案，通过小鼠脾细胞细胞内染色及流式细胞分析对本抗体进行验证。具每次检测建议使用≤1 µg抗体（检测定义为在100 µL终体积体系中对细胞样本进行染色所需的抗体量）。细胞数量需通过实验确定，建议范围在10^5至10^8个细胞/检测。为获得最佳实验效果，建议进行抗体滴定优化。

 

光敏性：该串联染料易发生光诱导氧化反应。请避光保存试剂及染色样本。

 

固定方案：样本可使用IC固定缓冲液（100 µL细胞样本+100 µL IC固定缓冲液）或1步固定/裂解溶液在4℃避光保存3天，且对荧光强度和FRET效率/补偿影响极小。虽然荧光基团在固定后的性能存在普遍规律，但具体克隆株的性能需通过实验验证。

 

激发光谱：488-561 nm；发射光谱：667 nm；适用激光器：蓝色激光器、绿色激光器、黄绿色激光器。

 

过滤说明：出厂后经过0.2 µm微孔过滤处理。

 

靶标信息

 

FOXP3（叉头框蛋白3）属于叉头/翼状螺旋转录调节因子家族，在哺乳动物中高度保守，对维持正常免疫稳态具有关键作用。该蛋白全长381个氨基酸，在CD25+CD4阳性调节性T细胞中稳定且高水平组成性表达，在CD4阳性/CD25阴性细胞中呈低水平表达，而在CD4阴性/CD8阳性T细胞中完全不表达。FOXP3可能是一个主调控基因，也是调节性T细胞更特异的标志物。FOXP3编码基因缺陷会导致小鼠出现scurfy表型。在人类中，该基因缺陷与IPEX综合征（免疫失调、多内分泌腺病、肠病、X-连锁综合征）密切相关，该病也被称为X-连锁自身免疫-过敏调节异常（XLAAD）综合征。研究已发现FOXP3存在编码不同异构体的转录变体。在人类乳腺癌和结肠癌细胞中，FOXP3的表达会受到p53蛋白的调控，以响应DNA损伤信号。